Mi az az endotoxin teszt?

Mi az az endotoxin teszt?

Az endotoxinok hidrofób molekulák, amelyek a Gram-negatív baktériumok külső membránjának nagy részét alkotó lipopoliszacharid komplex részét képezik.Akkor szabadulnak fel, amikor a baktériumok elpusztulnak, és külső membránjaik szétesnek.Az endotoxinokat tekintik a pirogén válasz fő tényezőinek.A pirogénekkel szennyezett parenterális termékek pedig láz kialakulásához, gyulladásos reakciók kiváltásához, sokkhoz, szervi elégtelenséghez és halálhoz vezethetnek az emberben.

Az endotoxin teszt a Gram-negatív baktériumokból származó endotoxinok kimutatására vagy mennyiségi meghatározására szolgáló teszt.

Először nyulakat alkalmaznak a gyógyszerészeti termékekben lévő endotoxinok kimutatására és mennyiségi meghatározására.Az USP szerint az RPT magában foglalja a hőmérséklet-emelkedés vagy a láz megfigyelését a gyógyszer nyulaknak történő intravénás injekciója után.A 21 CFR 610.13(b) pedig nyúl pirogén tesztet ír elő meghatározott biológiai termékekre.

Az 1960-as években Fredrick Bang és Jack Levin azt találta, hogy a patkórák amebocitái megalvadnak endotoxinok jelenlétében.ALimulus Amebocyte Lisate(vagy Tachypleus Amebocyte Lysate) ennek megfelelően fejlesztették ki a legtöbb RPT helyettesítésére.Az USP-n a LAL tesztet bakteriális endotoxin tesztnek (BET) nevezik.A BET-et pedig 3 technikával lehet elvégezni: 1) a gél-rög technika;2) a turbidimetriás technika;3) a kromogén technika.A LAL teszt követelményei tartalmazzák az optimális pH-t, az ionerősséget, a hőmérsékletet és az inkubációs időt.

Az RPT-vel összehasonlítva a BET gyors és hatékony.A BET azonban nem tudta teljesen helyettesíteni az RPT-t.Mivel a LAL vizsgálatot tényezők befolyásolhatják, és nem képes kimutatni a nem endotoxin pirogéneket.